Биохимические и иммунологические методы исследования

laboratoriaВ.Ю. Мишин

Биохимические исследования проводят с целью оценки характера туберкулезного процесса, прогнозирования его течения, выявления осложнений и сопутствующей патологии.

Для оценки активности процесса и выраженности воспаления рекомендуется определять в сыворотке крови содержание гаптоглобина (Нр), церулоплазмина (ЦП) и С-реактивного белка (СРБ), белковых фракций сыворотки крови и al-антитрипсина (al-AT).

Количественную оценку степени интоксикации организма проводят путем измерения уровня молекул средней массы (МСМ) в сыворотке крови. В связи со значительной частотой сахарного диабета и пограничных нарушений углеводного обмена у больных туберкулезом в комплекс обязательных исследований обязательно включают определение уровня гликемии натощак и содержание уровня гликозилированного гемоглобина.

Поскольку современная химиотерапия представляет значительную нагрузку для печени, а сам туберкулезный процесс часто сопровождается параспецифическими ее поражениями, комплекс первичных биохимических исследований должен включать тесты для оценки сохранности паренхимы печени, ее антитоксической, белоксинтезирующей и желчевыделительной функций (определение билирубина, АЛТ, ACT, ЩФ, тимоловой пробы).

Учитывая, что главным путем выведения лекарств из организма являются почки, а при туберкулезе отмечаются разные варианты нефропатий, при первичном исследовании необходимо определить уровень мочевины в крови для исключения декомпенсированной почечной недостаточности.

Принимая во внимание значительную частоту латентно протекающей внутрисосудистой коагуляции крови у больных туберкулезом легких, ее отрицательное влияние на процессы заживления и возможность развития тромбогеморрагических осложнений, у всех больных оценвают состояние системы гемостаза по данным тромбоэластограммы и содержанию в крови фибриногена.

Иммунологические исследования применяют для оценки состояния основных систем иммунитета, определения их клеточных структур, а также степени развития специфических иммунологических реакций. Эти данные способствуют решению ряда задач:

  • определению активности туберкулезного процесса;
  • определению характера течения заболевания;
  • проведению дифференциальной диагностики;
  • выявлению иммунологической недостаточности;
  • определению показаний к назначению иммуномодулирующей терапии;
  • диагностике лекарственной непереносимости, возникающей в процессе химиотерапии.

Для оценки иммунного статуса больных туберкулезом используют набор иммунологических методов.

Тесты для оценки количественного состояния CD3+ и CD22+ клеток (Т- и В-лимфоцитов) ирегуляторных субпопуляций CD4+ и CD8+ клеток (Т-хелперов иТ- супрессоров):

  • используют реакцию розеткообразования с бараньими эритроцитами или моноклональные антитела против поверхностных маркеров CD3 + , CD22+, CD4+ и CD8+ лимфоцитов. В норме CD3 + клетки составляют 60-70%, CD22+ клетки — 15-20%, CD4+ клетки — 35—65% и CD8+ клетки — 10—30%. Индекс соотношения CD4+ : CD8+ = 1,8-2,2.

Тесты для оценки функциональной активности сенсибилизированных к соответствующим антигенам Т-лимфоцитов in vitro:

  • реакция стимуляции Т-лимфоцитов митогеном фитогемаглютинином (РБТЛ с ФГА), который вызывает неспецифическую бласттрансформацию и митозы Т-лимфоцитов, свидетельствует о выраженности их функциональной активности. Лимфоциты культивируют с ФГА в течение 72 ч и определяют включение ЗН-тимидина в ДНК по числу импульсов в сцинтилляционном счетчике. В норме бласттрансформации подвергаются 50—60% лимфоцитов;
  • реакция стимуляции Т-лимфоцитов с туберкулином (РБТЛ с ППД), который вызывает специфическую стимуляцию и определяет степень сенсибилизации к микобактериальным антигенам; в норме бласттрансформации подвергаются 2—6% лимфоцитов.

Перспективным иммунологическим исследованием в диагностике туберкулеза является РБТЛ с ППД и определением концентрации ИФНа-у, который в норме составляет 140 ЕД/мл.

Тесты на определение функциональной,миграционной и адгезивной активности фагоцитов (лейкоциты имакрофаги):

  • реакция торможения миграции лейкоцитов с туберкулином in vitro (РТМЛ с PPD) в капиллярах. В норме индекс активности составляет 0,8-1,2.

Показателями иммунодефицита по приведенным выше иммунологическим тестам являются: количество CD3+ клеток <50%; количество CD4+ клеток <30%; количество CD8+ клеток >30% при их соотношении CD4+ : CD8+ <1,5; количество бласттрансформированн|ьгх лимфоцитов на ФГА <50%, на PPD <2%; торможение миграции макрофагов с PPD <20%.

Тесты на обнаружение антигенов МБТ и антител к ним методом иммуноферментного анализа (ИФА):

  • определение противотуберкулезных антител в сыворотке крови непрямым ИФА. В этом случае противотуберкулезные антитела связываются со специфическим антигеном на пластике, что образует комплекс антиген — антитело, который «проявляется» вторым антителом против человеческого иммуноглобулина, меченого ферментом. Реакцию проявляют хромогенным субстратом. Чем интенсивнее окраска, тем больше антител связалось с антигеном;
  • определение антигенов МБТ в сыворотки крови прямым ИФА. Антигены микобактерий связываются с гипериммунной кроличьей сывороткой, содержащей противотуберкулезные антитела. О наличии антигена судят по величине ингибиции (в %) противотуберкулезных антител.

Следует отметить, что диагностическое значение иммунологических тестов имеет ограниченный характер ввиду того, что положительные данные этих тестов могут быть у инфицированных здоровых лиц и отсутствовать у пациентов с явлениями иммунодефицита.

Перевод | transfer
Полезное
Метки
Bactec АБП Абсцесс Аллергия Альвеолиты Анализы БЦЖ Беременность Биопсия Бронхи Бронхит Бронхоаденит Бронхоблокация Бронхоскопия Бронхоэктазы Брюшина ВИЧ Вакцинация Витамины Гастрит Гепатит Гипертония Глаза Глотка Гортань Дезинфекция Дети Диабет Диспансер Диссеминированный Желудок Закон Зубы Иммунитет Инфильтративный КУМ Кавернозный Казеозная пневмония Кисты Кишечник Классификация Кожа Коллапсотерапия Кости Кровь Курение ЛФК Лаборатория Лазер Лимфогрануломатоз Лимфоузлы МБТ МЛУ МСЭ Менингит Микобактериоз Микоз Микроскопия Миндалины Мокрота Мониторинг Моча Мочеполовой Наркомания Нервы и психика Обследование Озонирование Опухоль Очаг Очаговый ПТК ПЦР Паротит Патогенетические Первичный Перикардит Печень Питание Пищевод Плазмаферез Плеврит Пневмокониозы Пневмония Побочные Поджелудочная Пожилые Позвоночник Посев Почки Профилактика Пьянство Рак Режимы лечения Рентген Рот Санаторий Санбюллетень Саркоидоз Сердце Симптомы Стационар Суставы Трахея Туб. интоксикация Туберкулома Устойчивость ФВД Фиброзно-кавернозный ХНЗЛ Химиотерапия Хирургия ЦНС Цирротический Шок ЭКГ Эмпиема Эндоскопия Язва