Биологический метод выявления микобактерий туберкулеза
Д.В. Шевчук, О.Е.Кузнецов
Наиболее чувствительным методом выявления микобактерий туберкулеза является заражение морских свинок (самые восприимчивые к туберкулезной инфекции лабораторные животные). Биологический метод применяется для выявления не только типичных, но и разнообразных, биологически измененных форм возбудителя, в частности L-трансформированных и фильтрующихся форм. Считается, что ее заражение позволяет диагностировать туберкулез при наличии в материале, использованном для заражения, 1 – 5 микробных клеток.
Серьезными недостатками биологического метода являются его высокая стоимость, необходимость специальных условий, длительность проведения анализа и зависимость результатов от чувствительности МБТ к противотуберкулезным препаратам. С введением в клиническую практику химиотерапии и появлением форм возбудителя, устойчивых к лекарственным препаратам, например, к изониазиду, биологическая проба, по мнению ряда исследователей, утратила свою эффективность. Под влиянием лекарственных противотуберкулезных препаратов многие штаммы снижают или теряют свою вирулентность.
Методика выполнения. Для повышения чувствительности метода (на 15-29%) создают у свинки состояние иммунодефицита путем ежедневного введения больших доз кортизона (12,5 мг). Перед заражением свинке ставят реакцию Манту с 0,02 мл туберкулина в наружную поверхность бедра. В качестве контроля в другое бедро вводят аналогичное количество стерильного бульона. При отрицательной реакции через 72ч можно начинать опыт. Исследуемый материал обрабатывают кислотой как при посеве, затем осадок тщательно трехкратно отмывают стерильным изотоническим раствором и вводят под кожу правой паховой области или в яичко.
Наблюдают, повторяют реакцию Манту. При наличии местных изменений и положительной реакции Манту свинку забивают через 4-6 недель, при отсутствии – через 3 месяца. При вскрытии может наблюдаться картина генерализованного туберкулеза, может наблюдаться увеличение регионарных лимфоузлов. Во время вскрытия делают мазки-отпечатки из органов для бактериоскопического исследования. При отсутствии макроскопической картины кусочки лимфоузлов, печени и селезенки гомогенизируют и засевают на питательные среды.
